Главная » 2014 » Июль » 15 » Скачать Функциональная активность хроматина в клетках печени крыс при подавлении синтеза белков циклогексимидом. Сидоренко, Любовь бесплатно
01:13
Скачать Функциональная активность хроматина в клетках печени крыс при подавлении синтеза белков циклогексимидом. Сидоренко, Любовь бесплатно
Функциональная активность хроматина в клетках печени крыс при подавлении синтеза белков циклогексимидом
Диссертация
Автор: Сидоренко, Любовь Ивановна
Название: Функциональная активность хроматина в клетках печени крыс при подавлении синтеза белков циклогексимидом
Справка: Сидоренко, Любовь Ивановна. Функциональная активность хроматина в клетках печени крыс при подавлении синтеза белков циклогексимидом : диссертация кандидата биологических наук : 03.00.04 Черноголовка, 1983 172 c. : 61 85-3/636
Объем: 172 стр.
Информация: Черноголовка, 1983
Содержание:
Глава
I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРНЫХ ДАННЫХ A Структурная организация хроматина эукариотических клеток , Б Регуляция функциональной активности хроматина I Организация функционально активных участков хроматина а) Обратигше процессы компактизациидекомпактизации хроматина б) Белковые спектры активного хроматина
2,- Реорганизация хроматина при транскрипщш а) Транспорт белков из цитоплазмы в ядро б) Модификация белков хроматина: ацетилирование в) Протеол1-13 как механизм регуляции активности хроматина
3 Регуляция транскрипц^ш на уровне взаимодействия РНКполимераз с хроматином а) Влияние сверхспирализации ДНК в хроматине на взаимодействие с'РНК-полимеразой и транскрипцию, • б) Стимуляторы РНК-полимеразной активности
4 Стимуляция репликации хроматина B Структурно-функЩ'Юнальные изменения хроматина во вретля клеточного щп^ла
1 Общее состояние хроматина в покоящихся штетках
2 Переход % >- G|;
3 Негистоновые белки и клеточный щит
4 1'истоны и 1^еточный цикл
5 ПолиплоидизируюЕЦ'Ю митозы
1', Структурно-функциональные изменения хроматина в клетках печени после частичной гепатэкTOMin-i д Структурно-функциональные изменения при г о л о дании и введении циклогексишда Затшочение ЭКСПЕРЙГ^ ШТАЛЬНАИ ЧАСТЬ Постановка задачи
Глава
II МАТЕРИАЛЫ И МЕГ ОДЫ Результаты ,
Глава
III ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МОДЕЛЬ ИССЛЕД0ВАНШ1 ШОГЕНЕЗА :{РОЩТИНАСТЙ^ЛЯЦИЯ ЬШ Р^ОМОЛЕКУЛЯРНЫХ СШТЕЗОВ И РЕПЖКАЩШ ДНК В ПЕЧЕЬШ КРЫС ВСЛЕДСТВИЕ П0ДАВ;Ш1П'1Я ТРАНСЖШ
Глава и ШШЕТИКА БИОСИНТЕЗА И МОДИФИКАЦИИ КОШОНЕНТОВ XPOIvlATHHA
1 Синтез гистоновых и негистоновых белков хроматина после введения циклогексимида
2 Ацетилирование гистонов
3 Метабол1'1зм гистонов в условиях ингибирования транслягщи а) Синтез гистонов » • б) Транспорт и распад гистонов в) Изменение прочности связей гистонов в хроматине
Глава У ИССЛЕДОВАНИЕ 1\ШАНИЗМ0В ЖШВШШ ХРОМАТИНА В УCЛOBИЯJ( ИНП4БЙР0ВАШШ ТРАНСЛЯЩД
Глава II 0БСУ1ДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ ЖТЕРАТУРА
Введение:
Актуальность проблемы. С изучением механизмов, контролирующих пролиферацию клеток, связано решение таких фундаглентальных проблем как нормальный и злокачественный рост, дифференцировка клеток, регенерация тканей, старение клеток. Исследование этих проблем лежит на пути познания принципов регуляции биосинтеза информационных макромолекул в клетках эукариот. Основу системы регуляции составляет замкнутый контур: ДНК-РНК-белок-ДНК, в котором система обратных связей в основном осуществляется белкагли. Факторы, способные изменять скорость или характер синтеза РНК и белков в покоящейся клетке, вызывают колшенсаторные изменения в этом цикле, В результате клетка или возвращается к прежнему состоянию покоя, или вступает в пролиферацию. Поэтому изучение механизмов клеточной пролиферации представляет не только теоретическую, но и большую практическую ценность.Однако многие детали этого процесса до сих пор не ясны, В частности, недостаточно изучены быстродействующие механизмы активации хроматина, играющие, по-видимому, определяюп1ую роль на ранних (первые часы) этапах клеточной пролиферации. Этой проблеме посвящена значительная часть нашей экспериментальной работы.Для изучения этапов клеточной пролиферации важным является выбор подходящего тест-объекта. Известно большое число клеточных систем со стимулированной пролиферацией, которые позволяют наблюдать изменения, характерные для различных фаз клеточной пролиферации. Нами предложена доступная, удобная и нетрудоемкая модель, в которой стимулящ^я пролиферации достигается однократным введением животным сублетальной дозы циклогексимида (ЦШ), специфически блокирующего трансляцию. Эта модель позволяет исследовать механизмы взаимосвязи и взаимодействия матричных биосинтезов, а также струк- 5 турные и функциональные изменения хроматина, сопряженные с этими взаимодействиями.Цель работы состояла в разработке сравнительно простой модели индукции синтеза ДНК в покоящихся клетках печени крыс с известным, в отличие от существующих моделей (например, модели частичной гепатэктомии), пусковым механизмом, связанным с блокадой трансляции, на которой бы последовательно и дискретно активировались синтезы РНК, белков и ДНК. Разработанная нами модель позволила выявить некоторые закономерности взаимосвязи процессов трансляции, транскрипции и репликации, а также изучить состояние и активность хроматина при разных уровнях трансляции.В задачи исследования входило выявление факторов, вызывающих переход клетки от состояния покоя в состояние активной пролиферации, а именно: 1. Подбором сублетальных доз циклогексимида четко разграничить активацию биосинтезов РНК, белков и ДНК по шкале времени, что облегчило бы возмолшость изучения процессов транскрипции, трансляции. и репликации, 2. Выяснить механизм активации хроматина в ранние часы после подавления синтеза белков циклогексимидом.3. Исследовать динамику: а) синтеза и ацетилирования гистоновых и негистоновых белков; б) протеолиза гистонов; в) РЖ-полимеразной активности в период стимуляции биосинтеза РН1{.4. Определить скорость транспорта ядерных белков из цитоплазмы в ядро.Новизна работы Предложен новый подход для исследования регуляции: матричных синтезов, основанный на явлениях стимуляции синтеза РНК, белков и ДНК в результате глубокого начального торможения биосинтеза белb ков циклогексимидом. Шксимумы активации биосинтеза этих макромо ^ лекул четко разграничены по шкале времени, что значительно облегчает возможность изучения взаимосвязи процессов транскрипции,трансляции и репликации.На этой модели впервые выявлены два быстродействующих механизма активации хроматина: первый состоит в активации транспорта белков из цитоплазмы в ядро, второй - связан с ограниченным протеолизом ацетилированной форглы гистона НЗ. Показано, что время жизни слабосвязанных негистоновых белков, в том числе, белков ШЛО, коррелирует с продолжительностью периода повышенной активности РНК-полимеразы II.В условиях действия ЦГИ идентифицировано два максимума синтеза гистонов, один из которых не сопряжен с синтезом Д1-1К. Практическая ценность. Разработанная модель применима для изучения механизмов роста, пролиферации, и, в том числе, неограниченной пролиферации при злокачественной транаЬормации клеток. Полученные факты могут быть использованы для оценки ряда экспериментальных результатов, связанных с реакцией клетки на различные воздействия, нарушающие скорость синтеза белков, например, передозировка лекарств, радиационное поражение организма, голодание, ранние стадии: химического канцерогенеза.Экспериментальная часть содержит три раздела: Материалы и ме
